紫外可見分光光度計(jì)用于定量分析方法
紫外可見分光光度計(jì)用于定量分析方法
定量分析是紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用中的最主要用途。這里簡要介紹7種定量分析方法：
(1)絕對(duì)法 目前，絕對(duì)法是紫外可見分光光度計(jì)諸多分析方法中使用最多的一種方法。
(2)標(biāo)準(zhǔn)法
(3)比吸收系數(shù)法 比吸收系數(shù)法多用于測(cè)定樣品溶液的濃度。但是，根據(jù)比耳定律，被測(cè)試樣溶液的濃度與吸光度應(yīng)呈直線關(guān)系，而在實(shí)際測(cè)試中，如果試樣的濃度較高時(shí)，會(huì)發(fā)現(xiàn)實(shí)際測(cè)量到的吸光度值偏離線性關(guān)系。這種偏離比耳定律的原因，是由于紫外可見分光光度計(jì)的雜散光、噪聲、基線平直度和光譜帶寬，以及試樣的前處理、試樣的化學(xué)平衡等所引起的。因此，一般情況下，不采用這種方法。
(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 紫外可見分光光度計(jì)最常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法。首先，用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液，然后，將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長下，測(cè)試每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的濃度值為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。最后，將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測(cè)得吸光度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對(duì)應(yīng)的濃度或含量。
(5)最小二乘法 最小二乘法實(shí)際上也就是回歸方程法。因?yàn)椋止夤舛确ㄖ性嚇拥奈舛華與試樣的濃度C之間的關(guān)系可用一條直線來描述。即c=aA+b（o、6為常數(shù)）。應(yīng)注意兩點(diǎn)：
①回歸方程是在特定條件下求得的，不能隨便套用；
②分光光度法中試樣的吸光度A與試樣的濃度c之間的關(guān)系，應(yīng)建立在回歸方程中的取值范圍內(nèi)，否則，不能隨便外推。
(6)解聯(lián)立方程法 解聯(lián)立方程法只適用于兩個(gè)以上、在紫外區(qū)吸收峰互不重疊組分的測(cè)定，也不是常用的方法。
(7)示差分光光度法 不差分光光度法也不是紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用中常用的方法。應(yīng)注意三點(diǎn)：
①示差分光光度法中最重要的是選擇適當(dāng)濃度的參比溶液，參比溶液越接近樣品溶液，則測(cè)定的結(jié)果就越準(zhǔn)確；
②示差分光光度法解決了普通分光光度法中不適用的高含量或痕量物質(zhì)的分析問題；
③示差分光光度法要求紫外可見分光光度計(jì)的穩(wěn)定性好、靈敏彥高（噪聲小、雜散光?。?。
